外泌体蛋白总量测定

    在外泌体的研究中，除了对外泌体的粒径数量、电镜形态做检测外，外泌体的蛋白总量也是非常关键的一项检测指标，可以通过对外泌体溶液中的蛋白质总量结合外泌体的粒径数量分析，更加科学合理的反应外泌体的整体数量。在早期的外泌体研究中，因为其检测所要求的仪器设备简单，检测的可重复性高，外泌体的蛋白浓度也被广泛的作为外泌体的计量单位。

      BCA蛋白定量的原理是， 碱性条件下，蛋白将 Cu2+还原为 Cu+，Cu+与 BCA 试剂相互作用形成紫色的络合物，该水溶性的复合物在 562nm 处显示强烈的吸光性，吸光度和蛋白浓度在广泛范围内有良好的线性关系，因此根据吸光值可以推算出蛋白浓度。该方法 灵敏度高，检测浓度下限达到25μ g/ml，最小检测蛋白量达到0.5 μg，待测样品体积为1-20 μ l。在50-2000 μ g/ml浓度范围内有较好的线性关系。BCA法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响，可以兼容样品中高达5%的SDS，5%的Triton X-100，5%的Tween 20、60、80。

一、仪器信息

   

ST-360型酶标仪

  1.波长范围：400-750nm

  2.读数范围：0.000-4.000

  3.线性范围：0.000-3.000

  4.测试速度：96孔/3秒

  5.传输方式：8道光纤通道

  6.光源：8V/50W 卤素灯

  7.显示：LCD 240（W）*180（H）全点阵中文液晶显示

  8.测量方式：单波长、双波长、双时法、动力学、多波长、计算机控制

  9.计算方式：吸光度法、因子计算法、标准浓度法、标准曲线法、单限检测法、双限检测法、等级检测法、列减法、点到点

二、样本要求：

  1.单个样本量不低于100微升

三、报告发布

  1.提供整板96孔板全部吸光度值原始数据，可根据客户设计的样本孔与标准孔的设置方案进行检测。

  2.线性相关系数（R²）应在在0.9900~0.9999

四、注意事项：

  1.本检测受螯合剂和略高浓度的还原剂的影响，需确保EDTA低于10mM，无EGTA，二硫苏糖醇(DTT)低于1mM， β -巯基乙醇(β -Mercaptoethanol)低于0.01%。

  2.请避免样本反复冻融，短距离运输请使用冰袋，长距离运输请使用干冰。

  3.样本如需加急，每个样本额外收取50-100元的费用。

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